民國101年5月號
理氣中藥厚朴的藥理研究回顧與新知
中藥厚朴本品為木蘭科植物厚朴 (Magnolia officinalis Rehd. et Wils.) 或凹葉厚朴 (Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var. biloba Rehd.et Wils.) 的乾燥幹皮、根皮及枝皮。
本品呈彎曲絲條狀或單、雙捲筒狀，外表面灰褐色，有時可見橢圓形皮孔或縱皺紋；內表面紫棕色或深紫褐色，較平滑，具細密縱紋，劃之顯油痕切面顆粒性，有油性，有的可見小亮星。味苦、辛，性溫，歸脾、胃、肺、大腸經，能燥濕消痰、下氣除滿，用於濕滯傷中，脘痞吐瀉，食積氣滯，腹脹便秘，痰飲喘咳 [1]，臨床應用方劑有：
1. 厚朴湯《宋‧太平惠民和劑局方》：厚朴、棗、丁香皮、甘草、丁香枝；
2. 半夏厚朴湯《金匱要略》：半夏、厚朴、茯苓、生薑、乾蘇葉；
3. 梔子厚朴湯《傷寒論》：梔子、厚朴、枳實；
4. 厚朴七物湯《金匱要略》：厚朴、甘草、大黃、枳實、桂枝、大棗、生薑；
5. 厚朴三物湯《金匱要略》：厚朴、大黃、枳實；
6. 厚朴大黄湯《金匱要略》：厚朴、大黃、枳實；
7. 大承氣湯《傷寒論》：大黃、厚朴、枳實、芒硝；
8. 小承氣湯《傷寒論》：大黃、厚朴、枳實。
其中厚朴三物湯、厚朴大黄湯與小承氣湯均由厚朴、大黃、枳實所組成，但三者藥量不同，主治效用各異，厚朴三物湯理氣效果較佳，小承氣湯瀉下作用較強，而厚朴大黄湯止咳化痰功效顯著 [2]。
厚朴主要含有木脂素類成分 [厚朴酚 (magnolol) 與和厚朴酚 (honokiol) ][3]、揮發油 [主要為桉葉油 (eucalyptus oil) ] [4, 5]、生物鹼 [主要為厚朴鹼 magnocurarine) ] [6] 等，而相關藥理研究包括：
1. 抗腫瘤作用：
在體外實驗或動物模型中，日本厚朴 (Magnolia obovata) 的乙醇提取物具有顯著抑制腫瘤侵襲的作用 [7]，厚朴酚或和厚朴酚被發現能抑制致癌劑及X輻射線所導致的細胞突變 [8]、抑制皮膚腫瘤形成 [9]、誘導何杰金氏淋巴瘤 (Hodgkin’s lymphoma，HL-60) 細胞凋亡 [10]。其機轉可能與Ras/Raf-1訊息傳遞路徑活化ERK，增加p21的表現，誘使癌細胞週期停滯 [11]，或著藉由活化Ras/Raf/ERK 訊息傳遞路徑，誘發p27KIP1 的表現，導致癌細胞週期停滯於G2/M期 [12]。另外在在HER2 過度表現之卵巢癌細胞中，藉由抑制HER2的基因表現，阻斷其下游訊息傳遞網路，而能抑制癌細胞的轉移能力 [13]。
2. 肌肉鬆弛作用：
厚朴酚與和厚朴酚能使肌肉鬆弛 [14, 15]，抑制氣管平滑肌收縮 [16]。
3. 鎮靜作用：
在動物模型中，厚朴酚對興奮的中樞神經系統具有鎮靜作用[17]，能抑制腦內5-羥基色胺 (5-hydroxytryptamine，5-HT) 釋放 [18]；和厚朴酚能促進K+誘發之乙醯膽鹼 (acetylcholine) 釋放 [19]，厚朴酚與和厚朴酚能增進GABAergic神經傳導 [20]，藉由上述藥理機制而達到鎮靜、抗焦慮作用。
4. 對微生物的抑制作用：
在抑菌實驗中，厚朴酚與和厚朴酚具有顯著抑制格蘭氏陽性、抗酸性之細菌與真菌生長的作用 [21]，同時對於髮癬菌 (Trichophyton mentagrophytes)、石膏樣小芽胞菌 (Microsporium gypseum)、絮狀表皮黴菌 (Epidermophyton floccosum)、黑麴菌 (Aspergillus niger)、新型隱球菌 (Cryptococcus neoformans)、白色念珠菌 (Candida albicans) [22]、放線桿菌 (Actinobacillus actinomycetemcomitans)、牙周致病菌 (Porphyromonas gingivalis)、間普雷沃菌 (Prevotella intermedia)、藤黃微球菌 (Micrococcus luteus)、枯草桿菌 (Bacillus subtilis) [23]、痤瘡桿菌 (Propionibacterium acnes)、顆粒丙酸桿菌 (Propionibacterium granulosum) [24]、抗萬古黴素 (vancomycin) 腸球菌 (enterococci)、抗甲氧西林 (methicillin) 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) [25]、植物致病真菌 [26] 等微生物具有顯著抑制其繁殖的活性。
5. 抗發炎作用：
厚朴酚能藉由抑制磷脂酶 (phospholipase，PL) A2、5-脂氧合酶 (lipoxygenase，LO) 、白三烯 (leukotriene，LT) C4 合成酶及LTA4 水解酶，而達到抑制LT 合成的作用 [27]，抑制大鼠出血性休克後發炎前驅細胞激素腫瘤壞死因子alpha (tumor necrosis factor alpha，TNFα) 與介白質 (interleukin，IL) -10的反應 [28]，經由抑制介白質IL-6誘發轉錄蛋白的訊息傳遞子與活化子 (signal transducer and activator of transcription protein，STAT) 3之活化，而抑制內皮細胞下游標靶基因的表現 [29]，抑制高糖所致人類視網膜色素上皮細胞的轉型生長因子 (transforming growth factor，TGF) -β1表現增加 [30]，抑制發炎、紫外線、氧化壓力所致皮膚NF-κB相關的基因表現 [31]，減少脂多醣 (lipopolysaccharide，LPS) 所致小腸發炎反應介質的表現及阻斷氧化壓力而達到防止敗血症所誘發的小腸蠕動障礙 [32]，降低小鼠皮膚誘發型一氧化氮合成酶 (inducible nitric oxide synthase，iNOS) 及環氧合酶 (cyclooxygenase，COX) -2 等發炎相關基因的表現 [33]，減少小鼠腸系膜缺血再灌注所導致增加的iNOS、TNF-α與IL-6的表現及血漿過氧亞硝酸根負離子 (peroxynitrite) 的濃度，並減輕肺損傷 [34]；此外，厚朴酚與和厚朴酚亦能有效減輕弗馬林所致小鼠的發炎性疼痛 [35]。
6. 抗氧化作用：
厚朴酚能減少過氧化傷害，提升敗血症小鼠的存活率 [36]，防止氧化劑三級過氧丁醇 (tert-butylhydroperoxide，TBHP) 所致DNA單股斷裂、細胞毒性與脂質過氧化 [37]，降低乙醯胺酚 (acetaminophen/N-acetyl - p - aminophenol，APAP ) 誘導的肝臟損傷大鼠脂質過氧化所伴隨之氧化壓力 [38]， 而厚朴酚類成份 obovatol 也具有抗氧化的作用 [39]；另外，由於厚朴酚與和厚朴酚同時具有抗氧化、抗發炎、抗腫瘤及抗菌等活性，特別是在皮膚疾患方面，能協助其衍生物及臨床試驗研發，增強實際效益 [40]，若比較兩者的抗氧化力，則以和厚朴酚較強 [41]。
7. 神經保護作用：
厚朴酚能降低6-羥基多巴胺 (6-hydroxydopamine，6-OHDA) 誘發巴金森氏症 (Parkinson's disease，PD) 模型小鼠的神經毒性，恢復其認知行為能力 [42]，厚朴酚與和厚朴酚也能顯著減少PC12神經細胞活性氧物質 (reactive oxygen species，ROS) 的生成及類澱粉β胜肽 (amyloid β peptide，Aβ) 所引起的細胞死亡，抑制細胞內鈣離子濃度上升及caspase-3的活性 [43]，並能藉由保留快速老化小鼠 (senescence-accelerated mice) 前腦膽鹼性神經元 (cholinergicneurons) ，而能防止學習及記憶功能衰退 [44]。
厚朴成份obovatol不僅可應用於探究微小膠細胞 (microglia) 的訊息傳遞，並能抑制微小膠細胞生成一氧化氮 (nitric oxide，NO) ，具有抗神經發炎的功效 [45]。厚朴成份4-O-methylhonokiol能抑制presenilin 2突變小鼠細胞外訊息調控激酶 (extracellular signal-regulated kinase，ERK) 及星狀神經膠細胞 (astrocytes) 的活化，並減少氧化傷害及發炎細胞激素的生成，從而達到改善記憶的作用 [46]。
厚朴的研究可謂方興未艾、如火如荼地進行著，除了上述過去幾年的研究之外，本文也將2011 年至2012 年較近期之相關研究，擇要摘述如下：
1. 抗癲癇作用：
Chen等人評估了厚朴酚對癲癇小鼠的抗痙攣作用及其相關機制，在腹腔注射pentylenetetrazol (PTZ，60 mg/kg) 30分鐘之前，分別給予小鼠20、40與80mg/kg 等不同濃度之厚朴酚，並觀察其行為變化，分析腦電波儀 (electroencephalography，EEG)，檢測體外電生理反應及海馬迴與腦皮質中 c-Fos 的表現。
實驗結果發現：與空白對照組相較，40 mg/kg與80 mg/kg 的厚朴酚能顯著延遲小鼠肌肉抽搐及泛發性強直陣攣癲癇 (generalized clonic seizures ) 的發作時間，縮短發作期並降低死亡率。EEG記錄結果顯示40 mg/kg與80 mg/kg的厚朴酚能延遲癲癇發作時間，並減少發作次數，且GABAA/benzodiazepine受體拮抗劑flumazenil能降低並逆轉厚朴酚的抗癲癇作用。在不含Mg2+的癲癇樣活動模型中，使用多電極陣列 (multi-electrode array) 記錄小鼠海馬迴切面，結果發現厚朴酚能減少自發性癲癇樣放電。
此外，厚朴酚也能顯著減少癲癇所引起梨狀皮質 (piriform cortex) 、齒狀迴 (dentate gyrus) 與海馬迴CA1區的Fos的免疫反應，而flumazenil則能抑制這些作用，因此Chen等人由上述結果推測厚朴酚主要是藉由GABAA/benzodiazepine受體複合物而達到對癲癇樣放電的抑制作用 [47]。
2. 對心血管的作用：
Seok等人探討了厚朴酚對大鼠主動脈環收縮的作用，以U46619 (30 nmol/L, 20 min)、NaF (8.0 mmol/L, 40 min)、phenylephrine (1.0 or 0.1 μmol/L,15min) 或 phorbol-12,13-dibutyrate (PDBu, 0.3 or 0.1 μmol/L, 40 min)使大鼠完整內皮與剝離的主動脈環收縮，再累積加入濃度0.3~30 μmol/L的厚朴酚則能引起主動脈環放鬆。在獨立實驗中以厚朴酚或DMSO空白對照預處理內皮剝離的主動脈環30min之後，累積濃度反應曲線分別為：NaF (2.0-12 mmol/L)、U46619 (1.0mol/L1.0μmol/L) 或PDBu (1.0 nmol/L1.0 μmol/L)。
另一方面，以G-LISA RhoA活性分析檢測鳥嘌呤核苷三磷酸 (guanosine triphosphate，GTP) RhoA的含量，並以免疫墨點法 (immunobloting) 觀察20 kDa的肌球蛋白輕鏈 (20 kDa myosin light chain，MLC20)、肌球蛋白磷酸酶標靶次單元1(myosin phosphatase-targeting subunit 1，MYPT1)與17kDa的異源三聚合肌球蛋白輕鏈磷酸酶蛋白激酶C強化之抑制蛋白(C-potentiated inhibitory protein for heterotrimeric myosin lightchain phosphatase of 17 kDa，CPI-17)的磷酸化情形。0.3-30 μmol/L 的厚朴酚能減少血栓素(thromboxane) A2 促效劑U46619 (30nmol/L)、氟化鈉 (8.0 mmol/L) 與α1-腎上腺素受體 (adrenoceptor) 促效劑苯腎上腺素 (phenylephrine，1.0或0.1 μmol/L) 所引起的完整內皮與剝離的主動脈環緊繃。
此外，厚朴酚對由各種藥物引起完整內皮與剝離的主動脈環收縮的鬆弛作用強度相近，以1.0、3.0或10 μmol/L的厚朴酚預處理大鼠主動脈環30 min後，能劑量相關性地抑制濃度反應曲線上對NaF與U46619的最大反應。最後，厚朴酚(3.0或10 μmol/L)能減少RhoA的活化及8.0 mmol/L的NaF或30 nmol/L的U46619所誘發之MLC20、MYPT1Thr855與CPI-17Thr38磷酸化，但對PDBu (0.1 μmol/L) 所誘發之CPI-17Thr38磷酸化則無影響。Seok等人由上述實驗結果得到推論：厚朴酚可能藉由抑制內皮剝離的大鼠主動脈的RhoA/Rho激酶訊息路徑，而達到降低血管收縮的作用 [48]。
3. 抗腫瘤作用機制研究：
外科手術、化療及放療對於末期胃腺癌病患仍非有效的治療方法，因此Rasul等人從植物天然物著手研究有效的抗癌藥，選擇並探討了厚朴酚對SGC-7901胃腺癌細胞的作用。以MTT染色觀察細胞的存活情形，流式細胞儀檢測細胞凋亡、粒線體膜電位以及細胞週期，西方墨點法 (Western blotting) 分析Bcl-2、Bax、caspase-3與PI3K/Akt的蛋白質表現。
結果發現厚朴酚劑量相關性地導致SGC-7901細胞變形、DNA損傷、細胞凋亡與細胞週期停滯於S期，並增加Bax/Bcl-2的比率、消耗粒線體膜電位 (ΔΨm) 、活化caspase-3並抑制PI3K/Akt，啟動粒線體及PI3K/Akt為媒介的凋亡路徑。此外，高濃度的厚朴酚能誘導SGC-7901細胞自體吞 噬 (autophagy) ，但不至於使細胞死亡。Rasul等人由上述實驗結果推測厚朴酚為一個抗胃腺癌的天然物，也許可供單一或混合的抗腫瘤治療之活體研究，並且有可能發展成為抗癌藥 [49]。
Nagalingam等人研究了和厚朴酚抑制乳癌細胞遷徙及侵襲的作用及其機制，以集落生成 (clonogenicity) 與3D-集落形成分析和厚朴酚對乳癌細胞生長的影響，利用基質膠侵襲 (matrigel invasion)、刮痕遷徙 (scratch-migration)、球體遷徙 (spheroid-migration) 與電子細胞基質阻抗判斷為基礎之遷徙 [ (electric cell-substrate impedance sensing (ECIS) -based migration) 評估和厚朴酚對乳癌細胞的遷徙及侵襲作用，並以西方墨點法及免疫螢光分析肝臟激酶B1 (liver kinase B1，LKB1) ─單磷酸腺苷活化蛋白激酶 (AMP-activated protein kinase，AMPK) 軸的活化情形，以AMPK缺乏型與AMPK野生型 (wild type，WT) 鼠胚胎纖維母細胞 (mouse embryonic fibroblasts，MEFs) 與純品系LKB1基因剔除的乳癌細胞株，觀察和厚朴酚對AMPK活化與LKB1過度表現的影響，並利用鼠異種移植 (xenografts)，免疫組織化學及西方墨點法分析腫瘤。
結果發現和厚朴酚能增加AMPK磷酸化及其活性，而和厚朴酚為媒介的磷酸化乙醯輔酶A羧化酶 (acetyl- coenzyme A carboxylase，ACC)-磷酸化p70S6激酶 (phosphorylation of p70S6kinase，pS6K) 的調控需要AMPK。此外，和厚朴酚能增加乳癌細胞之腫瘤抑制基因 LKB1的表現及細胞質轉位，剔除LKB1基因則導致和厚朴酚為媒介的AMPK活化、乳癌細胞遷徙、侵襲及腫瘤形成受到抑制，而分析以和厚朴酚處理的腫瘤發現其細胞質內的LKB1與磷酸化AMPK的濃度有顯著增加。
Nagalingam等人由上述實驗結果推知在和厚朴酚介導的乳癌細胞遷徙與侵襲的抑制作用中，LKB1-AMPK軸的分子機制被完整揭露，未來可能應用於乳癌的治療 [50]。
Ponnurangam等人評估了和厚朴酚增強大腸癌幹細胞 (cancer stem cells，CSCs) 對游離輻射 (ionizing radiation，IR) 的敏感度，結果發現和厚朴酚與IR合併使用能抑制大腸癌細胞的增殖與集落形成，並誘導癌細胞凋亡，減少CSC標記蛋白DCLK1的表現、球體的數目及體積。流式細胞儀觀察發現合併和厚朴酚與IR的組合能減少DCLK1陽性細胞的數目，降低活化的Notch-1及其ligand Jagged-1、下游標靶基因Hes-1的表現，並抑制Notch-1活化γ-分泌酶複合物 (gamma-secretase complex) 、Presenilin 1、Nicastrin、Pen2與APH-1的表現，而Notch細胞內domain表現時，和厚朴酚的作用有減弱的情形。
活體實驗中，異種移植腫瘤的裸鼠給予腹腔注射和厚朴酚並暴露於IR下，結果能顯著抑制腫瘤的生長，異種移植組織的DCLK1與Notch訊息相關蛋白的濃度皆下降。綜上結果，Ponnurangam等人推測和厚朴酚可能藉由抑制大腸癌幹細胞的γ-分泌酶複合物與Notch訊息路徑，而能抑制大腸癌的生長，也許可作為未來臨床評估和厚朴酚與IR合併用於大腸癌療效之依據 [51]。
4. 神經保護與改善認知能力：
過去研究發現厚朴酚具有活體內與外的神經保護作用，因此Gong等人使用全細胞膜電壓箝定法 (whole-cell voltage-clamp method) ，探討了厚朴酚對NG108-15神經細胞電壓閥鈉離子通道 (voltage-gated Na+ channels，VGSC) 與電壓閥鉀離子通道[voltage-gated K+ (Kv) channels] 的影響。
結果發現厚朴酚能以微弱狀態相關性 (state-dependence) 地抑制VGSC，但無頻率相關性 (frequency-dependence) 的阻斷。在穩定狀態不活化曲線 (steady-state inactivation curve) 上，觀察到厚朴酚抑制VGSC [固定電位 (holding potentials) 分別為−70 mV與−100 mV時，IC50分別為15 μM與30 μM]並引起一個18 mV的向左位移，抑制Kv通道的IC50為21μM，並引起一個20 mV的向左位移，但對電壓相關性的活化則無影響。Gong等人綜合實驗結果得到推論：厚朴酚能抑制VGSC與Kv通道，而此活性可能與其神經保護作用有關 [52]。
研究發現阿茲海默氏症 (Alzheimer's disease，AD) 與神經發炎及Aβ的堆積有關，而obovatol具有抗發炎及神經營養活性，因此Choi等人探討了obovatol對2種認知功能喪失的AD模型鼠的影響，1種為於每隻模型鼠腦室內intracerebroventricular，i.c.v.) 注射2.0 μg的Aβ1–42，另1種則為表現突變型人類類澱粉前驅蛋白 (amyloid precursor protein，APP) K670N、M671L的Tg2576模型鼠。
結果在Morris水迷宮 (water maze) 試驗與被動式迴避學習操作 (passive avoidance tasks) 試驗中，於側腦室注射Aβ1–42的AD模型鼠引起神經發炎並導致記憶障礙，而給予obovatol則能顯著減少Aβ1–42所致記憶異常。Tg2576模型鼠連續3個月長期投予obovatol (1mg/kg/day) 能顯著改善認知能力，抑制星狀神經膠細胞活化、β分泌酶 (beta-secretase，BACE) 1的表現與NF-κB的活化。此外，Thioflavin T螢光染色與電子顯微鏡分析發現obovatol能劑量相關性地有效抑制Aβ的纖維顫動 (fibrillation)。
Choi等人由實驗結果發現obovatol能防止AD模型鼠記憶衰退，推論其可能機制為藉由抑制NF-κB訊息 路徑及Aβ的纖維形成，而能改善神經發炎與類澱粉的生成情形 [53]。
Lee等人過去研究發現LPS誘導的神經發炎會造成記憶障礙，最近則繼續探討了4-O-methylhonokiol 對此記憶障礙的預防作用及其相關機制。每日7次給予AD模型鼠腹腔注射LPS (250 μg/kg)，口服4-O-methylhonokiol (0.5mg/kg與1 mg/kg溶於0.05%乙醇) 後，觀察防止記憶障礙與類澱粉生成的效用，以及對LPS處理過的星狀神經膠細胞與BV-2微小膠細胞的抗神經發炎與抗類澱粉生成的效用。結果發現AD模型鼠口服4-O-methylhonokiol後能劑量相關性地改善LPS誘發的記憶障礙，並抑制腦內發炎相關蛋白：iNOS、COX-2與神經膠纖維酸性蛋白 (glial fibrillary acidic protein，GFAP) 的表現。
在體外實驗中，4-O-methylhonokiol能抑制加入LPS培養的星狀神經膠細胞的iNOS與COX-2的表現，以及ROS、NO、前列腺素 (prostaglandin) E2、TNF-α與IL-1β的生成。在分子機制研究中，4-O-methylhonokiol能藉由抑制星狀神經膠細胞的IκB降解及p50與p65轉位至細胞核，而能抑制NF-κB的轉錄及與DNA的結合活性，並能抑制 LPS刺激的腦、星狀神經膠細胞與BV-2微小膠細胞所誘導之Aβ1-42生成、β-與γ-分泌酶活化、類澱粉前驅蛋白、BACE1與C99的表現、星狀神經膠細胞的活化與神經細胞死亡。
Lee等人由上述結果推測4-O-methylhonokiol藉由抗發炎機制而達到抑制LPS所誘導之類澱粉生成，未來可能發展成為抗AD等神經發炎相關疾病之藥物 [54]。
5. 抗發炎作用：
纖維母細胞樣滑液膜細胞 (fibroblast-like synoviocytes，FLS) 在破壞性關節炎的病理過程中，生成大量的催化性細胞激素與基質金屬蛋白酶 (matrix metalloproteinases，MMPs)，為一個重要的病理因素。因此Wang等人經由研究厚朴酚對發炎介質的分泌、NF-κB與AP-1的活化路徑，用ELISA與RT-PCR檢測IL-1β刺激的FLS的IL-6、COX-2、前列腺素E2與MMPs的濃度，西方墨點法、報導基因法、凝膠電泳遷移率改變分析 (electrophoretic mobility shift assay) 與共軛焦顯微鏡觀察細胞激素的表現，及對丁酸分枝桿菌(Mycobacterium butyricum)誘發關節炎模型大鼠的療效，以評估厚朴酚的抗關節炎活性。
結果厚朴酚能劑量相關性 (2.5–25 μg/mL) 地顯著抑制IL-1β(10ng/mL)誘導的細胞激素表現，並藉由抑制轉錄因子的細胞核轉位及與DNA結合活性，而能抑制IKK/IκB/NF-κB與絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPKs)訊息路徑的活化。在動物實驗方面，厚朴酚(100 mg/kg)能明顯抑制關節炎模型大鼠爪腫脹，並降低血清中發炎細胞激素的濃度。綜上所述，Wang等人推測厚朴酚能抑制關節炎的惡化，可能發展成為發炎性關節炎疾病的一個新療法[55]。
6. 對造骨細胞的保護作用：
抗黴素 (antimycin) A 會阻斷細胞粒線體電子傳遞鏈，導致大量產生ROS，而Choi探究了厚朴酚對抗黴素A所致MC3T3-E1造骨細胞毒性的保護作用。MC3T3-E1造骨細胞先加入厚朴酚培養，再加入抗黴素A，以MTT染色觀察細胞存活情形，茜素紅 (Alizarin Red) 染色觀察細胞礦化情形，檢測粒線體膜電位 (mitochondrial membrane potential，MMP)、複合物IV的活性與ATP濃度以評估粒線體功能障礙，分析心磷脂 (cardiolipin) 氧化程度、粒線體超氧陰離子濃度與硝基酪胺酸(nitrotyrosine) 含量，以評估厚朴酚對MC3T3-E1細胞的抗氧化作用，並以ELISA檢測磷酸化的環化單磷酸腺苷反應元素結合蛋白 (cAMP-response element-binding protein，CREB)。
結果厚朴酚藉由防止MMP消失、ATP喪失與CREB不活化，而能顯著減少抗黴素A所致造骨細胞功能障礙，並減少心磷脂過氧化、粒線體超氧陰離子與硝基酪胺酸的生成。Choi由上述推測厚朴酚可能藉由其抗氧化活性與抑制粒線體功能障礙，而能保護抗黴素A所致造骨細胞損傷，對骨質疏鬆或其他骨質退化性疾病可能具有減少或防止造骨細胞退化的作用 [56]。
7. 代謝動力學之研究：
過去研究發現厚朴酚在人體內經歷大量的葡萄糖醛酸反應 (glucuronidation) ，因此Zhu等人探討了厚朴酚在體外的人類肝臟及小腸中的葡萄糖醛酸反應路徑，利用重組型人類尿苷雙磷酸葡萄糖醛酸基轉移酶酵素 [uridine diphosphate (UDP) -glucuronosyltransferase enzymes，UGTs]，包括與厚朴酚的葡萄糖醛酸反應有關的異構酶UGT1A1、1A3、1A7、1A8、1A9、1A10與2B7進行分析。
結果進行厚朴酚葡萄糖醛酸反應的人類肝臟微粒體 (human liver microsomes，HLM) 、人類小腸微粒體 (human intestine microsomes，HIM) 與大部分的重組型UGTs呈現強力受質抑制動力學 (substrate inhibition kinetics) 的特徵，其中UGT1A10受質抑制程度相對較低，而UGT1A9催化的反應則呈現兩相動力學 (biphasic kinetics) 的特徵。
以化學抑制研究與相對活性因子 (relative activity factor，RAF) 分析UGTs在HLM與HIM的厚朴酚葡萄糖醛酸反應中所扮演的角色，結果發現UGT2B7主要負責HLM中的反應，而UGT2B7與UGT1A10主要負責HIM中的反應。綜上實驗結果，Zhu等人推論RAF可有效分析厚朴酚的葡萄糖醛酸反應路徑，釐清具有多種非典型動力學的UGT異構酶個別所扮演的角色 [57]。
參考文獻
1. 國家藥典委員會，《中華人民共和國藥典》2010 年版一部，化學工業出版社，p. 235，2010 年。
2. 寇俊萍、禹志領、龔樹強、嚴永清，小承氣湯、厚朴大黃湯及厚朴三物湯藥理作用，中成藥，26:57-59，2004。
3. Chen, F.C., Lee, J.S., Lin, Y.M. Biphenyls from the heartwood of Taiwan sassafras. Phytochemistry, 22:616-617, 1983.
4. 樓之岑、秦波，常用中藥材品種整理和質量研究 (第二冊) ，北京，北京醫科大學，中國協和醫科大學聯合出版社，1995
5. Pu, Q.L., Pannell, L.K., Xiao-Duo, J. The essential oil of Magnolia officinalis. Planta Med., 56:129-130, 1990.
6. 國家醫藥管理局中藥情報中心站，植物藥有效成分手冊，北京，人民衛生出版社，p. 839，1986。
7. Nagase, H., Ikeda, K., Sakai, Y. Inhibitory effect of magnolol and honokiol from Magnolia obovata on human fibrosarcoma HT-1080. Invasiveness in vitro. Planta Med.,67:705-708, 2001.
8. Saito, J., Shibuya, K., Nagase, H. Anti-clastogenic effect of magnolol on benzo(a)pyrene-induced clastogenicity in mice. Food Chem. Toxicol., 46:694-700, 2008.
9. Konoshima, T., Kozuka, M., Tokuda, H., Nishino, H., Iwashima, A., Haruna,M., Ito, K., Tanabe, M. Studies on inhibitors of skin tumor promotion, IX. Neolignans from Magnoliaoffic inalis. J. Nat. Prod., 54:816-822, 1991.
10. Zhong, W.B., Wang, C.Y., Ho, K.J., Lu, F.J., Chang, T.C., Lee, W.S. Magnolol induces apoptosis in human leukemia cells via cytochrome c release and caspase activation. Anticancer Drugs, 14:211-217, 2003.
11. Hsu, Y.F., Lee, T.S., Lin, S.Y., Hsu, S.P., Juan, S.H., Hsu, Y.H., Zhong, W.B., Lee, W.S. Involvement of Ras/Raf-1/ERK actions in the magnolol-induced upregulation of p21 and cell-cycle arrest in colon cancer cells. Mol. Carcinog 46:275-283, 2007.
12. Lee, S.J., Cho, Y.H., Park, K., Kim, E.J., Jung, K.H., Park, S.S., Kim W.J., Moon, S.K. Magnolol elicits activation of the extracellular signal-regulated kinase pathway by inducing p27KIP1-mediated G2/M-phase cell cycle arrest in human urinary bladder cancer 5637 cells. Biochem. Pharmacol., 75:2289-2300 2008.
13. Chuang, T.C., Hsu, S.C., Cheng, Y.T., Shao, W.S., Wu, K., Fang, G.S., Ou, C.C., Wang, V. Magnolol down-regulates HER2 gene expression, leading to inhibition of HER2-mediated metastatic potential in ovarian cancer cells. Cancer Lett., 311:11-19, 2011.
14. Watanabe, K., Watanabe, H.Y., Goto, Y., Yamamoto, N., Yoshizaki, M. Studies on the active principles of magnolia bark. Centrally acting muscle relaxant activity of magnolol and hōnokiol. Jpn. J. Pharmacol., 25:605-607, 1975.
15. Watanabe, H., Watanabe, K., Hagino, K. Chemostructural requirement for centrally acting muscle relaxant effect of magnolol and honokiol, neolignane derivatives. J. Pharmacobiodyn., 6:184-190, 1983.
16. Ko, C.H., Chen, H.H., Lin, Y.R., Chan, M.H. Inhibition of smooth muscle contraction by magnolol and honokiol in porcine trachea. Planta Med., 69:532-536, 2003.
17. Watanabe, K., Watanabe, H., Goto, Y., Yamaguchi, M., Yamamoto, N., Hagino,K. Pharmacological properties of magnolol and hōnokiol extracted from Magnolia officinalis: central depressant effects. Planta Med., 49:103-108, 1983.
18. Tsai, T.H., Lee, T.F., Chen, C.F., Wang, L.C. Modulatory effects of magnolol on potassium-stimulated 5-hydroxytryptamine release from rat cortical and hippocampal slices. Neurosci. Lett., 186:49-52, 1995.
19. Tsai, T.H., Westly, J., Lee, T.F., Chen, C.F., Wang, L.C. Effects of honokiol and magnolol on acetylcholine release from rat hippocampal slices. Planta Med., 61:477-479, 1995.
20. Squires, R.F., Ai, J., Witt, M.R., Kahnberg, P., Saederup, E., Sterner, O., Nielsen,M. Honokiol and magnolol increase the number of [3H] muscimol binding sites three-fold in rat forebrain membranes in vitro using a filtration assay, by allosterically increasing the affinities of low-affinity sites. Neurochem.Res., 24:1593-1602, 1999.
21. Clark, A.M., El-Feraly, F.S., Li, W.S. Antimicrobial activity of phenolic constituents of Magnolia grandiflora L. J. Pharm. Sci., 70:951-952, 1981.
22. Bang, K.H., Kim, Y.K., Min, B.S., Na, M.K., Rhee, Y.H., Lee, J.P., Bae, K.H.Antifungal activity of magnolol and honokiol. Arch. Pharm. Res., 23:46-49, 2000.
23. Ho, K.Y., Tsai, C.C., Chen, C.P., Huang, J.S., Lin, C.C. Antimicrobial activity of honokiol and magnolol isolated from Magnolia officinalis. Phytother.Res., 15:139-141, 2001.
24. Park, J., Lee, J., Jung, E., Park, Y., Kim, K., Park, B., Jung, K., Park, E., Kim,J., Park, D. In vitro antibacterial and anti-inflammatory effects of honokiol and magnolol against Propionibacterium sp. Eur. J. Pharmacol., 496:189-195,2004.
25. Syu, W.J., Shen, C.C., Lu, J.J., Lee, G.H., Sun, C.M. Antimicrobial and cytotoxic activities of neolignans from Magnolia officinalis. Chem. Biodivers.,1:530-537, 2004.
26. Choi, N.H., Choi, G.J., Min, B.S., Jang, K.S., Choi, Y.H., Kang, M.S., Park,M.S., Choi, J.E., Bae, B.K., Kim, J.C. Effects of neolignans from the stem bark of Magnolia obovata on plant pathogenic fungi. J. Appl. Microbiol., 106:2057-2063,2009.
27. Hamasaki, Y., Kobayashi, I., Zaitu, M., Tsuji, K., Kita, M., Hayasaki, R., Muro,E., Yamamoto, S., Matsuo, M., Ichimaru, T., Miyazaki, S. Magnolol inhibits leukotriene synthesis in rat basophilic leukemia-2H3 cells. Planta Med.,65:222-226, 1999.
28. Shih, H.C., Wei, Y.H., Lee, C.H. Magnolol alters cytokine response after hemorrhagic shock and increases survival in subsequent intraabdominal sepsis in rats. Shock, 20:264-268, 2003.
29. Chen, S.C., Chang, Y.L., Wang, D.L., Cheng, J.J. Herbal remedy magnolol suppresses IL-6-induced STAT3 activation and gene expression in endothelial cells. Br. J. Pharmacol., 148:226-232, 2006.
30. Kim, Y.S., Jung, D.H., Kim, N.H., Lee, Y.M., Kim, J.S. Effect of magnolol on TGF-β1 and fibronectin expression in human retinal pigment epithelial cells under diabetic conditions. Eur. J. Pharmacol., 562:12-19, 2007.
31. Tanaka, K., Hasegawa, J., Asamitsu, K., Okamoto, T. Magnolia ovovata extract and its active component magnolol prevent skin photoaging via inhibition of nuclear factor κB. Eur. J. Pharmacol., 565:212-219, 2007.
32. Yang, T.C., Zhang, S.W., Sun, L.N., Wang, H., Ren, A.M. Magnolol attenuates sepsis-induced gastrointestinal dysmotility in rats by modulating inflammatory mediators. World J. Gastroenterol., 14:7353-7360, 2008.
33. Kuo, D.H., Lai, Y.S., Lo, C.Y., Cheng, A.C., Wu, H., Pan, M.H. Inhibitory effect of magnolol on TPA-induced skin inflammation and tumor promotion in mice. J. Agric. Food Chem., 58:5777-5783, 2010.
34. Shih, H.C., Huang, M.S., Lee, C.H. Magnolol attenuates the lung injury in hypertonic saline treatment from mesenteric ischemia reperfusion through diminishing iNOS. J. Surg. Res., in press, 2011.
35. Lin, Y.R., Chen, H.H., Ko, C.H., Chan, M.H. Effects of honokiol and magnolol on acute and inflammatory pain models in mice. Life
Sci., 81:1071-1078, 2007.
36. Kong, C.W., Tsai, K., Chin, J.H., Chan, W.L., Hong, C.Y. Magnolol attenuates peroxidative damage and improves survival of rats with sepsis. Shock, 13:24-28,2000.
37. Li, H.B., Gao, J.M., Ying, X.X., Wang, S.P., Li, J.C. Protective effect of magnolol on TBHP-induced injury in H460 cells partially via a p53 dependent mechanism. Arch. Pharm. Res., 30:850-857, 2007.
38. Chen, Y.H., Lin, F.Y., Liu, P.L., Huang, Y.T., Chiu, J.H., Chang, Y.C., Man,K.M., Hong, C.Y., Ho, Y.Y., Lai, M.T. Antioxidative and hepatoprotective effects of magnolol on acetaminophen-induced liver damage in rats. Arch. Pharm.Res., 32:221-228, 2009.
39. Shen, C.C., Ni, C.L., Shen, Y.C., Huang, Y.L., Kuo, C.H., Wu, T.S., Chen, C.C.Phenolic constituents from the stem bark of Magnolia officinalis. J. Nat.Prod., 72:168-171, 2009.
40. Shen, J.L., Man, K.M., Huang, P.H., Chen, W.C., Chen, D.C., Cheng, Y.W., Liu,P.L., Chou, M.C., Chen, Y.H. Honokiol and magnolol as multifunctional antioxidative molecules for dermatologic disorders. Molecules, 15:6452-6465,2010.
41. Zhao, C., Liu, Z.Q. Comparison of antioxidant abilities of magnolol and honokiol to scavenge radicals and to protect DNA. Biochimie, 93:1755-1760,2011.
42. Chen, H.H., Lin, S.C., Chan, M.H. Protective and restorative effects of magnolol on neurotoxicity in mice with 6-hydroxydopamine-induced hemiparkinsonism. Neurodegener. Dis., 8:364-374, 2011.
43. Hoi, C.P., Ho, Y.P., Baum, L., Chow, A.H. Neuroprotective effect of honokiol and magnolol, compounds from Magnolia officinalis, on beta-amyloid-induced toxicity in PC12 cells. Phytother. Res., 24:1538-1542, 2010.
44. Matsui, N., Takahashi, K., Takeichi, M., Kuroshita, T., Noguchi, K., Yamazaki K., Tagashira, H., Tsutsui, K., Okada, H., Kido, Y., Yasui, Y., Fukuishi,N., Fukuyama, Y., Akagi, M. Magnolol and honokiol prevent learning and memory impairment and cholinergic deficit in SAMP8 mice. Brain Res., 1305:108-117, 2009.
45. Ock, J., Han, H.S., Hong, S.H., Lee, S.Y., Han, Y.M., Kwon, B.M., Suk, K.Obovatol attenuates microglia-mediated neuroinflammation by modulating redox regulation. Br. J. Pharmacol., 159:1646-1662, 2010.
46. Lee, Y.J., Choi, I.S., Park, M.H., Lee, Y.M., Song, J.K., Kim, Y.H., Kim,K.H., Hwang, D.Y., Jeong, J.H., Yun, Y.P., Oh, K.W., Jung, J.K., Han,S.B., Hong, J.T. 4-O-Methylhonokiol attenuates memory impairment in presenilin 2 mutant mice through reduction of oxidative damage and inactivation of astrocytes and the ERK pathway. Free Radic. Biol. Med., 50:66-77, 2011.
47. Chen, C.R., Tan, R., Qu, W.M., Wu, Z., Wang, Y., Urade, Y., Huang, Z.L.Magnolol, a major bioactive constituent of the bark of Magnolia officinalis, exerts antiepileptic effects via the GABA/benzodiazepine receptor complex in mice. Br.J. Pharmacol.,64:1534-1546, 2011.
48. Seok, Y.M., Kim, H.Y., Garmaa, O., Cha, B.Y., Woo, J.T., Kim, I.K. Effects of magnolol on vascular contraction in rat aortic rings. Clin. Exp. Pharmacol.Physiol., 39:28-36, 2012.
49. Rasul, A., Yu, B., Khan, M., Zhang, K., Iqbal, F., Ma, T., Yang, H. Magnolol, a natural compound, induces apoptosis of SGC-7901 human gastric adenocarcinoma cells via the mitochondrial and PI3K/Akt signaling pathways. Int.J. Oncol., 40:1153-1161, 2012.
50. Nagalingam, A., Arbiser, J.L., Bonner, M.Y., Saxena, N.K., Sharma, D.Honokiol activates AMP-activated protein kinase in breast cancer cells via LKB1-dependent pathway and inhibits breast carcinogenesis. Breast Cancer Res., 14:R35, 2012.
51. Ponnurangam, S., Mammen, J.M., Ramalingam, S., He, Z., Zhang, Y., Umar,S., Subramaniam, D., Anant, S. Honokiol in combination with radiation targets Notch signaling to inhibit colon cancer stem cells. Mol. Cancer Ther., in press,2012.
52. Gong, C.L., Wong, K.L., Cheng, K.S., Kuo, C.S., Chao, C.C., Tsai, M.F., Leung,Y.M. Inhibitory effects of magnolol on voltage-gated Na+ and K+ channels of NG108-15 cells. Eur. J. Pharmacol., in press, 2012.
53. Choi, D.Y., Lee, J.W., Peng, J., Lee, Y.J., Han, J.Y., Lee, Y.H., Choi, I.S., Han,S.B., Jung, J.K., Lee, W.S., Lee, S.H., Kwon, B.M., Oh, K.W., Hong, J.T.Obovatol improves cognitive functions in animal models for Alzheimer's disease.J. Neurochem., 120:1048-1059, 2012.
54. Lee, Y.J., Choi, D.Y., Choi, I.S., Kim, K.H., Kim, Y.H., Kim, H.M., Lee, K., Cho,W.G., Jung, J.K., Han, S.B., Han, J.Y., Nam, S.Y., Yun, Y.W., Jeong, J.H., Oh,K.W., Hong, J.T. Inhibitory effect of 4-O-methylhonokiol on lipopolysaccharide-induced neuroinflammation, amyloidogenesis and memory impairment via inhibition of nuclear factor- kappa B in vitro and in vivo models. J.Neuroinflammation, 9:35, 2012.
55. Wang, J.H., Shih, K.S., Liou, J.P., Wu, Y.W., Chang, A.S., Wang, K.L., Tsai,C.L., Yang, C.R.Anti-arthritic effects of magnolol in human interleukin 1β-stimulated fibroblast-lik esynoviocytes and in a rat arthritis model. PLoS One, 7:e31368, 2012.
56. Choi, E.M.Magnolol protects osteoblastic MC3T3-E1 cells against antimycin A-induced cytotoxicity through activation of mitochondrial function. Inflammation, in press,2012.
57. Zhu, L., Ge, G., Zhang, H., Liu, H., He, G., Liang, S., Zhang, Y., Fang, Z., Dong,P., Finel, M., Yang, L.Characterization of hepatic and intestinal glucuronidation of magnolol: application of the relative activity factor approach to decipher the contributions of ultiple UDP-glucuronosyltransferase isoforms. Drug Metab. Dispos., 40:529-538, 2012.