民國105年3月號
小青龍湯的現代研究新知
小青龍湯在中國古代被用來對付急性呼吸道疾病已有數千年之久。在亞洲，用小青龍湯來治療支氣管哮喘已長達幾世紀之久。小青龍湯是一種用於治療長期鼻過敏、鼻炎和支氣管哮喘的傳統漢方醫學草藥配方。在此，整理了近期對於小青龍湯的科學論文，希望對於小青龍湯有更進一步深入的認識。
1. 小青龍湯萃取物 (SST) 內含八種生藥材，在日本藥典裡的第16版有記錄。先前的研究報告中指出小青龍湯萃取物SST的抗過敏作用，但並沒有對其中八種生藥材在治療效果上的貢獻進行研究。科學家在本研究中將利用老鼠的被動皮膚過敏反應 (PCA) 對其進行評估 [1]。
材料與方法：以水煎煮所有生藥材，冷凍乾燥後製成小青龍湯萃取物SST。為評估活性成分，生藥材的組合經過調整及煎煮。引發皮膚過敏反應 (PCA) 的方式是在鼠耳進行皮內注射抗卵白蛋白 (OVA) 血清的48小時後，再靜脈注射卵白蛋白 (OVA) 和伊文思藍。在引發皮膚過敏反應 (PCA) 反應兩小時前，給予整夜空腹的老鼠口服生藥材萃取物。引發皮膚過敏反應 (PCA) 反應30分鐘後，移除鼠耳並測量鼠耳內伊文思藍的量。
結果：小青龍湯萃取物SST的口服用藥以藥效與劑量成正比的方式抑制皮膚過敏反應 (PCA) 反應。小青龍湯萃取物SST包含的八種生藥材中，細辛根、半夏和甘草發揮了確實的作用，而芍藥則無。我們從芍藥萃取物中分離出牡丹皮苷E (mudanpioside E) 作為反作用成分，來呈現因芍藥而降低作用的小青龍湯萃取物SST的抗過敏功效。
結論：當使用小青龍湯萃取物SST治療過敏性疾病時，從傳統配方中去除芍藥的成分可增強效果 [1]。
2. 探討小青龍湯 (XQLT) 對神經營養因子 (neurotrophin) 在因塵蟎 (Der P) 引起急性過敏性哮喘的小鼠以及肺腺瘤LA4細胞模型的影響 [2]。測量內容包括小青龍湯對神經生長因子 (NGF)、腦源性神經營養因子 (BDNF) 的調節作用、氣道高反應性 (AHR) 以及免疫球蛋白E的影響。
作法：用100 μg/ ml的塵蟎刺激肺腺瘤LA4細胞24小時後，收集上層液用於酵素連結免疫分析法 (ELISA) 分析。使用在塵蟎刺激之前或同時以小青龍湯治療的肺腺瘤LA4細胞評估小青龍湯對神經營養因子 (neurotrophin) 以及 Balb/c老鼠的影響。在第0天和第7天於老鼠尾巴注射50 μg塵蟎 (在50μl不完全弗氏佐劑 (IFA) 中乳化)。在第14天讓老鼠的氣管接受50 μl塵蟎的挑戰。於第2、4、6、8、10、12天口服小青龍湯 (1 g/Kg) 作為預防性策略，或在第15天服用作為治療性策略。
實驗結果：小青龍湯可抑制受塵蟎過敏原刺激的肺腺瘤LA4細胞裡的神經生長因子 (NGF) 、腦源性神經營養因子 (BDNF) 以及胸腺活化調節細胞因子 (TARC) 的過敏表現。無論是預防性或治療性護理都能減少氣道高反應性 (AHR) 。預防性護理顯著降低了支氣管肺泡灌洗液 (BALF) 的神經生長因子和血清裡的腦源性神經營養因子 (BDNF)，而治療性護理僅降低血清裡的腦源性神經營養因子 (BDNF)。
因小青龍湯的治療而減少的神經生長因子 (NGF) 與氣道高反應性 (AHR) 的降低是互相呼應的。減少的支氣管肺泡灌洗液、神經生長因子、胸腺活化調節細胞因子 (TARC) 和血清裡的腦源性神經營養因子 (BDNF) 可能是減少嗜酸性粒細胞滲入肺組織的因素。免疫組織化學顯示兩種治療方案均能降低老鼠肺部的p75NTR及其受體水平，而這種現象或許與小青龍湯預防哮喘反應的作用有關。
結論：小青龍湯能調節神經營養因子並降低TARC，進而緩解因塵蟎引發過敏之老鼠體內的過敏性炎症，包括AHR、IgE升高以及嗜酸性粒細胞的滲透。小青龍湯對過敏性哮喘老鼠具有預防與治療的效果顯示出其成為藥物標靶治療的潛力。
3. 大部分的急性呼吸道疾病是由病毒引起的。然而，因小青龍湯無法有效對抗流感病毒使其在呼吸道病毒感染的作用備受質疑。即便如此，小青龍湯也許仍可有效對抗其他的呼吸道病毒：人類的呼吸道合胞病毒 (HRSV) [3]。
材料與作法：小青龍湯熱水萃取物對抗HRSV的活動是由人體的上呼吸道細胞 (HEp-2) 和下呼吸道細胞 (A549) 裡，斑塊減少的試驗報告來評估。其對合胞體形成及病毒融合蛋白 (F protein) 的作用分別用顯微鏡和免疫印跡直接檢視。對於小青龍湯刺激IFN-β的作用是以酵素連結免疫分析法 (ELISA) 來評估。
結果：小青龍湯熱水萃取物在藥效劑量成正相關時能抑制HEp-2和A549細胞 (P<0.0001) ，尤其在病毒接種 (P<0.0001) 之前給藥。小青龍湯可抑制病毒附著 (P<0.0001) 和內化 (P<0.0001)。300微克/毫升的小青龍湯能降低HRSV引發的合胞體的數量和大小，而不對病毒融合蛋白產生明顯作用。小青龍湯能在病毒接種之前和之後刺激上皮細胞分泌IFN-β，以對抗病毒感染 (P<0.0001)。
結論：小青龍湯透過預防病毒附著、內化、合胞體形成，並刺激干擾素的分泌，來有效對抗呼吸道上皮細胞的HRSV感染。
4. 以前的研究顯示，在過敏原攻擊致敏老鼠前施用單劑量和多劑量的小青龍湯，可抑制氣道高反應性和氣道炎症。在這項研究中，目的是小青龍湯在減弱哮喘症狀的嚴重程度，以及因塵蟎反覆引發慢性哮喘之老鼠體內的免疫調節機制的潛力[4]。
材料與作法：BALB / c小鼠是於氣管內 (IT) 接種五劑塵蟎 (50微升，1毫克/毫升) ，並以1週間隔口服小青龍湯 (1克/千克)。在最後一次引發的三天後處死老鼠，以評估氣道重塑、炎症、肺組織學特徵，以及細胞因子和各種基因的表達譜。
結果：小青龍湯明顯減少了支氣管炎性細胞浸潤和氣道重塑，它抑制了血清裡因塵蟎引起的總免疫球蛋白E和塵蟎變異性的免疫球蛋白G1，並透過抑制核轉錄因子 (NF-κB) 的活化，改變了支氣管肺泡灌洗液中的「T (H) 2-BIOS」。膠原蛋白測定和組織病理學表示小青龍湯能降低在肺部的氣道重塑。同時，從RT-PCR的分析顯示，小青龍湯下調了肺部中IL-10、IL-13、RANTES、Eotaxin和MCP- 1 mRNA的表現。此外，EMSA和免疫組織化學染色說明了小青龍湯抑制了支氣管上皮細胞細胞核裡NF-κB的表現。
結論：這些結果表示，小青龍湯具有抗呼吸道發炎、抗氣道重塑，以及在慢性哮喘老鼠中有明確的免疫調節作用。
5. 小青龍湯在亞洲有效治療慢性阻塞性肺疾病 (COPD) 已長達好幾百年。然而，它的機制尚不明確。為了闡明該問題，科學家分析了小青龍湯對慢性阻塞性肺病老鼠之基因表達概況的影響 [5]。
在研究中，將20隻雄性Wistar大鼠注射脂多醣 (LPS)，並置於香煙煙霧及溫度-20℃的環境中每天5分鐘連續8天，養成慢性阻塞性肺病的動物。觀察氣管超微結構和組織形態，以確定這些模型是否培養成功，並利用cDNA微陣列檢測基因表達圖譜。
研究發現有56個與慢性阻塞性肺病進展相關的差異表達基因，其中包括32個上調基因和24個下調基因。這些基因被證實與免疫和炎症反應、代謝、細胞運輸和細胞週期、信號轉導和基因調控等活動有關。治療組和對照組之間的基因表達比較顯示，只有11個差異表達基因，分別是5上調基因和6下調基因。
此研究的結論是，小青龍湯是透過影響基因表達，對慢性阻塞性肺病的大鼠產生治療效果。有些基因藥物或標靶治療也許能成為有效管理慢性阻塞性肺病的的新療法。
參考文獻
1. Tsukamoto, K., Yamamoto, K., and Makino, T. (2014) Counteractive effect of Paeonia lactiflora root constituent mudanpioside E against suppressive effect of Shoseiryuto-extract on passive cutaneous anaphylaxis reaction in mice. Journal of ethnopharmacology 153, 884-889.
2. Chang, R. S., Wang, S. D., Wang, Y. C., Lin, L. J., Kao, S. T., and Wang, J. Y. (2013) Xiao-Qing-Long-Tang shows preventive effect of asthma in an allergic asthma mouse model through neurotrophin regulation. BMC complementary and alternative medicine 13, 220.
3. Chang, J. S., Yeh, C. F., Wang, K. C., Shieh, D. E., Yen, M. H., and Chiang, L. C. (2013) Xiao-Qing-Long-Tang (Sho-seiryu-to) inhibited cytopathic effect of human respiratory syncytial virus in cell lines of human respiratory tract. Journal of ethnopharmacology 147, 481-487.
4. Wang, S. D., Lin, L. J., Chen, C. L., Lee, S. C., Lin, C. C., Wang, J. Y., and Kao, S. T. (2012) Xiao-Qing-Long-Tang attenuates allergic airway inflammation and remodeling in repetitive Dermatogoides pteronyssinus challenged chronic asthmatic mice model. Journal of ethnopharmacology 142, 531-538.
5. Zhang, C., Feng, L., Li, M., Dong, C., and Zhang, W. (2012) Effects of Xiaoqinglong decoction on gene expression profiles in a rat chronic obstructive pulmonary disease model. Bioscience trends 6, 262-269.